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Title: GST-Glypican 3 N端融合蛋白表达载体构建及表达纯化
Author: 肖明兵 ; 赵敏星 ; 倪润洲 ; 江枫 ; 周嘉伟
Source: 临床检验杂志
Issued Date: 2010
Volume: 1, Issue:3, Pages:212-214
Keyword: 磷酯酰肌醇蛋白聚糖3 ; 载体 ; 克隆 ; 表达
Abstract: 目的构建人磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican3,GPC3)N端蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达及纯化。方法以重组质粒pcDNA3.1-GPC3N为模板,扩增GPC3 N端基因,产物经纯化回收后与载体PGEX-4T-1连接并转化大肠埃希菌Rosetta,酶切鉴定序列完全正确者诱导表达GST-GPC3 N端融合蛋白,并以谷胱甘肽琼脂糖小珠亲和纯化。结果Glypican 3 N端基因片段成功插入载体PGEX-4T-1,插入位点及碱基序列完全正确,转化Rosetta后,经IPGT诱导成功表达分子质量为64 000的GST-GPC3 N端融合蛋白。结论成功建立了重组GST-GPC3 N端融合蛋白的原核表达载体、表达菌株及诱导表达和纯化的方法,为GPC3 N端融合蛋白的进一步应用打下基础。
Language: 中文
Content Type: 期刊论文
URI: http://ir.sibs.ac.cn/handle/331001/2345
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